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通過離心柱在溶液中進行疊氮-炔生物分子結合的異源催化
銅催化的疊氮-炔環加化學反應(簡稱CuAAC)應用廣泛,尤其可以用于生物正交的結合反應中。美國洛杉磯Occidental學院的科學家Jeremy Kallick等利用可選擇的活化的CuAAC開發了一種單管式、異源生物分子結合及純化方法。二價銅前體在中性配位體1,10-鄰二氮雜菲-5,6-二酮或陰離子配體4,7-二苯基-1,10-鄰二氮雜菲-二磺酸和鋅汞合金還原劑的離子交換基質下轉化成活性的一價銅。將一價銅復合物加到商品化的微量離心柱的分子篩基質上,乙炔基標記的生物分子和疊氮配體的混合物流過柱子,得到純凈有效的生物分子結合物。這個方法可以應用于糖基化DNA寡核苷酸和香豆素染料標記的膜通透多肽(八個精氨酸)。
原文:
Jeremy Kallick, Sarah Harris, Andrew K. Udit, and Michael G. Hill,Heterogeneous catalysis for azide-alkyne bioconjugation in solution via spin column: Attachment of dyes and saccharides to peptides and DNA, BioTechniques 59:329-334 ( January 2016)